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解決方案

臺盼藍染色液(0.4%)說明書

點擊次數(shù):16132  日期:2018/7/11 10:18:49

【臺盼藍染色液產(chǎn)品概述】
臺盼藍(Trypan blue)又稱錐藍或錐蟲藍等,分子式為 C34H24N6Na4O14S4,分子量為960.81,CAS Number72-57-1,是一種陰離子型染料。Trypan blue不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色,即產(chǎn)生所謂的拒染現(xiàn)象,而死亡細胞的細胞膜通透性增加,可使染料通過細胞膜進入細胞內(nèi),使死細胞著色呈藍色,是最常用的檢測細胞活率的方法。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經(jīng)死亡,這不中性紅作用相反。因此,借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養(yǎng)中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。
Trypan blue stain(0.4%)常用于檢測細胞膜的完整性以及細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色,而死細胞會被染成淡藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬,故可用于巨噬細胞的活體染色劑。臺盼藍染色后,通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù),就可以對細胞存活率進行比較精確的定量,0.4%為最常用的濃度。

Component

SBJ-0245S

SBJ-0245M

Store at

Trypan blue stain(0.4%)

50ml

100ml

4

【臺盼藍染色液保存條件】
 4℃,6個月
【臺盼藍染色液使用方法】
1、收集細胞:
如果收集貼壁細胞,應(yīng)用胰蛋白酶-EDTA溶液消化細胞,收集細胞。如果收集懸浮細胞,則可以直接收集細胞。收集好的細胞在1000~2000g離心1min,棄上清,用1ml PBS重新懸浮細胞沉淀。
2、臺盼藍染色:
吸取100μl細胞懸液到1.5ml或0.5ml離心管內(nèi),加入100μlTrypan blue stain(0.4%)輕輕混勻,靜置染色3min(染色時間可適當延長,但不宜超過10min)。
3、細胞計數(shù):
吸取經(jīng)過染色后的細胞,用血細胞計數(shù)板計數(shù)。通常如果要比較精確地進行定量,每個細胞樣品至少需要數(shù)500個細胞,數(shù)出藍色細胞和細胞總數(shù)。細胞存活率計算公式如下:
細胞存活率=(細胞總數(shù)-藍色細胞數(shù))/細胞總數(shù)×100%
【注意事項】
1、Trypan blue stain對人體有輕微毒性,請注意小心防護。
2、注意凋亡小體偶爾也有臺盼藍拒染現(xiàn)象。
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
 
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